MagAttract HMW DNA Kit

• Reproduzierbare Isolierung von DNA mit hohem Molekulargewicht
• Hohe Ausbeuten und Reinheit aus einer Vielzahl an Probenmaterialien
• Schnelle und praktische Protokolle
• Vollständige Entfernung von Inhibitoren

Das MagAttract HMW DNA Kit gewährleistet die reproduzierbare Isolierung von genomischer DNA > 150 kb. Die mit dem MagAttract HMW DNA Kit isolierte DNA wurde mit Hilfe von Pulsed-Field-Gelelektrophorese mit der mit anderen Magnetpartikel-basierten Verfahren isolierten DNA verglichen. Das MagAttract HMW DNA Kit zeigte überlegene Ergebnisse bei der Isolierung von DNA mit hohem Molekulargewicht (siehe Abbildung  Erfolgreiche Isolierung von DNA mit hohem Molekulargewicht).

Konsistent hohe Ausbeute und Reinheit
Das MagAttract HMW DNA Kit nutzt ein bequemes, unkompliziertes Verfahren zur Gewinnung hoher Ausbeuten an reiner DNA mit hohem Molekulargewicht. Schonende Lysebedingungen minimieren die DNA-Fragmentierung, während Verunreinigungen und PCR-Inhibitoren effizient entfernt werden, sodass reine DNA mit hohem Molekulargewicht erhalten wird. Die optimierte Chemie und das optimierte Verfahren des MagAttract HMW DNA Kit erhöhen die DNA-Ausbeute und -Reinheit verglichen mit klassischen Spin-Säulen- oder Magnetpartikel-basierten Methoden anderer Anbieter deutlich (siehe Abbildung  Höchste Ausbeute und Reinheit und  Verbesserte Ausbeute aus verschiedenen Probentypen).

Effektive Entfernung von PCR-Inhibitoren
Hochsensitive Applikationen wie Real-time PCR oder NGS erfordern die Entfernung von Antikoagulanzien, Enzymen, divalenten Kationen und anderen ähnlichen Inhibitoren. Es wurde eine Real-time PCR-Amplifikation von DNA durchgeführt, die aus EDTA-, Heparin- und Citrat-stabilisierten Blutproben mit dem MagAttract HMW DNA Kit isoliert wurde. In keiner der Proben wurde eine Inhibition beobachtet; alle zeigten eine hochlineare Korrelation der C_T-Werte mit dem eingesetzten Probenvolumen (siehe Abbildung  Keine Inhibition in aus antikoaguliertem Blut gewonnenen Proben).

Genomische DNA gebrauchsfertig für das Next Generation Sequencing
Da Technologien zur massiven parallelen Sequenzierung (MPS) mit kurzen Read-Längen arbeiten, kann eine Sequenzierung mit intakter genomischer DNA > 10 kb durchgeführt werden. De-novo-Genom-Assemblierung sowie die Entdeckung angeborener oder erworbener Strukturvarianten stellen jedoch mit Standardprodukten zur DNA-Aufreinigung noch immer eine Herausforderung dar. Mate-Pair-Bibliotheken mit größeren Inserts können einen signifikanten Einfluss auf den Sequenzierungserfolg haben, besonders bei komplexen Genomen mit vielen Repeats. Die mit dem MagAttract HMW DNA Kit gewonnene genomische DNA mit hohem Molekulargewicht kann direkt für NGS-Experimente eingesetzt werden.

Das praktische MagAttract Protokoll ermöglicht reproduzierbare Ergebnisse in nur 70 Minuten.

Schnelles und optimiertes Protokoll
Optimierte Puffer und Enzyme lysieren Proben schonend, sodass die Fragmentierung der genomischen DNA minimiert wird. Das Verfahren besteht aus 4 einfachen Schritten: Lyse, Binden, Waschen und Eluieren. Nach der Probenlyse bindet die DNA an die Oberfläche der Magnetpartikel. Während der Waschschritte werden Verunreinigungen und PCR-Inhibitoren effektiv entfernt, und reine DNA mit hohem Molekulargewicht wird in Buffer AE eluiert (siehe Abbildung  MagAttract HMW DNA Kit Verfahren).