DNeasy mericon Food Kit
Para la extracción de ADN de gran calidad de alimentos crudos o procesados
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DNeasy mericon Food Kit (50)
Cat. No. / ID: 69514
50 QIAquick Spin Columns, Proteinasa K, tampones
El DNeasy mericon Food Kit está concebido para aplicaciones de biología molecular en pruebas de alimentos, piensos y productos farmacéuticos. Este producto no está concebido para el diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.
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Features
- El procedimiento de CTAB modificado garantiza un procesamiento más rápido de las muestras de alimentos
- Purificación eficaz incluso del ADN fragmentado de alimentos procesados.
- Sin arrastre de los inhibidores de la PCR a partir de matrices de alimentos complejas
- Protocolos para alimentos altamente procesados
Product Details
El DNeasy mericon Food Kit está diseñado para permitir la extracción de ácidos nucleicos de gran calidad a partir de diversos alimentos crudos y procesados. El arrastre de los inhibidores de la PCR a partir de estas matrices de alimentos complejas se reduce al mínimo. El kit forma parte de una gama completa de pruebas de alimentos de QIAGEN, que también ofrece ensayos para la detección de ADN patógeno y OMG y la autenticación de ingredientes. El procedimiento puede automatizarse completamente en el instrumento QIAcube Connect.
Performance
Durante la producción, los alimentos están sujetos al calor, la irradiación, la alta presión y a cambios en el pH que provocan la degradación y fragmentación del ADN. La química optimizada del DNeasy mericon Food Kit se desarrolló para recuperar fragmentos cortos de ADN (de hasta 100 pb), lo que garantiza el aislamiento eficaz incluso de ADN altamente fragmentado y la posterior amplificación en reacciones de PCR. Con estas características, la extracción con el DNeasy mericon Food Kit es el primer método de extracción de aplicación universal que genera resultados óptimos y fiables, incluso cuando se utilizan alimentos con mucha capacidad de inhibición, altamente procesados, grasos, ácidos, con alto o bajo contenido en ADN (consulte la figura «Alto rendimiento del ADN y arrastre inhibidor mínimo» y la figura «Resistencia elevada a los inhibidores»). Además, ya no es necesario establecer varios procedimientos de lisis para diferentes matrices de alimentos.
Principle
El DNeasy mericon Food Kit utiliza una extracción con bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB) mejorada a partir de ácidos nucleicos celulares totales.
El detergente de CTAB no iónico se suele usar para la extracción eficaz de ácidos nucleicos celulares totales a partir de una amplia variedad de tipos de tejido. En función de las condiciones de salinidad, el CTAB puede formar un complejo con los ácidos nucleicos celulares (condiciones de baja salinidad) o formar complejos con inhibidores celulares, como los polisacáridos, las proteínas o los metabolitos de las plantas (condiciones de alta salinidad, tal como se encuentra en el tampón de lisis de alimentos).
Al incluir menos pasos del flujo de trabajo que los protocolos de CTAB convencionales, se pueden procesar hasta 30 muestras en 2,5 horas (consulte la figura «Extracción rápida y eficaz de ADN»). Se ha observado que la recuperación de ADN con estos kits es alta y eficaz.
Procedure
Los protocolos optimizados para el DNeasy mericon Food Kit usan CTAB junto con Proteinase K para digerir primero el tejido compacto y después precipitar las proteínas con la precipitación simultánea de otros inhibidores celulares y derivados de los alimentos.
Los inhibidores se precipitan mediante centrifugación, mientras que el ADN extraído permanece en la solución. En la posterior extracción con cloroformo, cualquier resto de complejo CTAB-proteína, CTAB-residuos o CTAB polisacárido no precipitado se elimina junto con otros inhibidores lipofílicos mediante extracción en la fase de cloroformo orgánico. Solo se continúa procesando la fase acuosa que contiene el ADN y los inhibidores significativamente agotados. Esta fase se mezcla con el tampón de unión (para ajustar las condiciones de unión) y se aplica a las QIAquick Spin Columns. El ADN resultante está inmediatamente listo para su uso en un ensayo de real-time PCR mericon anterógrado.
Applications
El DNeasy mericon Food Kit está diseñado para la rápida purificación (hasta 30 extracciones en 2,5 horas) de ADN a partir de diversas matrices de alimentos crudos y procesados, al tiempo que reduce al mínimo el arrastre de los inhibidores de la PCR inherente a muestras de alimentos complejas.
Supporting data and figures
Alto rendimiento de ADN y arrastre mínimo de inhibidores.
Se prepararon muestras de mantequilla de cacahuete y chocolate con el DNeasy mericon Food Kit (protocolo estándar) y productos de otros 3 proveedores para amplificar un segmento del gen de ARNt de cloroplasto tnrL. (A) El valor medio de cuantificación (Cq) es sustancialmente inferior para las muestras preparadas con el DNeasy mericon Food Kit en comparación con los otros proveedores. (B) Al utilizar ADN sin inhibidor, este ensayo proporciona un cambio de Cq positivo entre 2,9-3,5 cuando las muestras se diluyen 1:10; los cambios inferiores indican la presencia de inhibidores. Para detectar inhibidores arrastrados del procedimiento de preparación de las muestras, estas se diluyeron 1:10 y se amplificó el mismo segmento de ADN. Ambas muestras de alimento no tenían inhibidores cuando se prepararon con el DNeasy mericon Food Kit. Las muestras preparadas con productos de otros proveedores mostraron una fuerte contaminación por inhibidores.
Resources
Kit Handbooks (1)
Safety Data Sheets (1)
Brochures & Guides (3)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
Why is my 260/280 ratio low after using the DNeasy mericon Food Kit?
Does salt concentration in the food matter when using the DNeasy mericon Food Kit?
CAn I use milk or other liquids with the DNeasy mericon Food kit? What volume would I use?
Why does the DNeasy mericon Food Kit use a QIAquick column and Buffer PB rather than a DNeasy column and Buffer AL, which might be expected since the kit isolates genomic DNA?