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FlexiGene DNA Kit (250)
Cat. No. / ID: 51206
Pour l’isolement de l’ADN génomique à partir de sang total, de couche leucocytaire et de cellules de culture dans un même tube avec préparation de kit rapide
Le règlement REACH (CE 1907/2006 Annexe XIV) s’applique aux substances réglementées que contient ce produit. L’utilisation de ce produit au sein de l’UE est soumise à une exemption (article 56(3)). Pour plus d’informations, consultez le règlement REACH ainsi que la fiche de données de sécurité de ce produit, que vous trouverez dans la section « Ressources » de cette page.
Le FlexiGene DNA Kit est destiné aux applications de biologie moléculaire. Ce produit n’est pas conçu pour le diagnostic, la prévention ou le traitement des maladies.
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Caractéristiques
- Manipulation facile, aucun risque de mélange d’échantillons
- Purification modulable à partir de 0,1 à 20 ml de sang total
- Purification directe à partir de sang total, couche leucocytaire et cellules de culture
- Procédure rapide
- Pas d’extraction organique
Détails produit
Le système FlexiGene utilise une centrifugation simple pour isoler un ADN particulièrement pur à partir de sang total, couche leucocytaire et cellules de culture. Le FlexiGene DNA Kit contient des tampons et du QIAGEN Protease pour la purification directe et simple dans un même tube. Pour connaître les solutions automatisées utilisant les réactifs FlexiGene, contactez Autogen, Inc.
Performances
L’ADN purifié utilisant le système FlexiGene mesure jusqu’à 150 kb (voir l’illustration « ADN génomique de haute qualité »). Il se révèle performant dans les expériences d’amplification et de transfert de Southern, il est également adapté à l’archivage (voir l’illustration « Analyse par PCR performante en aval »).
L’ADN est purifié à partir de 0,1 à 20 ml (sang), 0,1 à 2 ml (couche leucocytaire) ou 1 à 2 × 106 cellules (cellules de culture) dans un même tube, traités par centrifugation. Vous pouvez traiter douze échantillons en 1 heure. Selon la taille de l’échantillon, le volume de réhydratation est de 0,2 à 1 ml.
| Échantillon | Volume | Rendement d’ADN (µg) |
|---|---|---|
| Sang* | 0,3 ml | 11 à 14 |
| Sang* | 2,0 ml | 75 à 90 |
| Sang* | 10,0 ml | 380 à 460 |
| Couche leucocytaire | 0,5 ml | 110 à 130 |
| Cellules HeLa | 106 cellules | 25 à 35 |
Voir les illustrations
Principe
Le système FlexiGene DNA permet l’isolement de l’ADN génomique à partir de quantités variables de sang total, couche leucocytaire et cellules de culture. La procédure simple de purification s’effectue dans un même tube, ce qui réduit les coûts et simplifie la manipulation. L’ADN purifié se révèle performant dans des applications sensibles en aval.
Procédure
La première étape consiste à ajouter le tampon de lyse aux échantillons (voir le schéma « Procédure FlexiGene DNA »). Les noyaux cellulaires et les mitochondries sont sédimentés par centrifugation puis remis en suspension dans un tampon de dénaturation contenant du QIAGEN Protease. Après la digestion des protéines, l’ADN est précipité par ajout d’isopropanol, récupéré par centrifugation, lavé à l’éthanol à 70% puis séché. L’ADN est remis en suspension dans un tampon d’hydratation, il peut ensuite être utilisé directement dans des dosages en aval ou être conservé à –20 ºC. Vous obtenez des rendements d’ADN élevés à partir de sang total, couche leucocytaire et cellules de culture (voir le tableau « Rendements d’ADN purifié à partir de divers types d’échantillons avec la procédure FlexiGene »).
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Applications
L’ADN purifié à l’aide du FlexiGene DNA Kit se révèle performant dans des applications en aval, notamment :
- PCR
- Transfert de Southern
- Archivage
Données et illustrations utiles
Procédure FlexiGene DNA.
La première étape consiste à ajouter le tampon de lyse aux échantillons. Les noyaux cellulaires et les mitochondries sont sédimentés par centrifugation puis remis en suspension dans un tampon de dénaturation contenant du QIAGEN Protease. Après la digestion des protéines, l’ADN est précipité par ajout d’isopropanol, récupéré par centrifugation, lavé à l’éthanol à 70% puis séché. L’ADN est remis en suspension dans un tampon d’hydratation, il peut ensuite être utilisé directement dans des dosages en aval ou être conservé à –20 ºC.
Specifications
| Features | Specifications |
|---|---|
| Applications | Techniques de PCR, digestion par enzymes de restriction, transfert de Southern, séquençage |
| Sample amount | 100 µl à 20 ml |
| Format | Modulable |
| Time per run or per prep | 25 à 45 minutes (+ réhydratation d’ADN) |
| Main sample type | Sang total, couche leucocytaire, cellules de culture |
| Technology | Méthode de précipitation à un seul tube |
| Processing | Manuel |
| Yield | 35 µg/ml de sang total |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | ADN génomique |
| Elution volume | 200 µl à 1 000 µl |
Ressources
Kit Handbooks (1)
Additional Resources (2)
Supplementary Protocols (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publications
The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205
FAQ
Do you have a protocol for purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit?
Do you have stability data for genomic DNA isolated with the Flexigene DNA Kit?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?
What is the composition of Buffer FG3?