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FlexiGene DNA Kit (250)
Cat. No. / ID: 51206
For isolation of genomic DNA from whole blood, buffy coat, and cultured cells in a single tube with fast kit preparation
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本製品には、REACH（EC 1907/2006 Annex XIV）で規制されている物質が含まれています。EU内での本製品の使用は、適用除外（第56条(3)）により許可されています。詳細については、このページの「リソース」セクションにあるREACH通知および本製品のSDSを参照してください。
FlexiGene DNA Kitは分子生物学的アプリケーション用であり、疾病の診断、予防、あるいは治療に使用することはできません。
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特徴
- 簡便な操作でサンプルの取り違えのリスクなし
- 0.1～20 ml（全血）の幅広いスタートサンプル量からの精製
- 全血、バフィコート、培養細胞から直接精製
- 迅速なプロトコール
- 有機溶媒抽出不要
製品詳細
FlexiGene DNA Systemは簡単な遠心操作により、全血、バフィコート、培養細胞から高純度DNA を精製します。FlexiGene DNA KitにはバッファーとQIAGEN Proteaseが添付されており、1本のチューブ内で簡単に精製できます。FlexiGene試薬を用いた自動化ソリューションに関しては、倉敷紡績株式会社にお問い合わせください。
パフォーマンス
FlexiGene systemを用いて精製されたDNAのサイズは最大150 kbです（図" 高品質なゲノムDNA"）。精製DNAは、増幅およびサザンブロット法の実験で優れたパフォーマンスを示し、長期保存にも適しています（図" 効率的なダウンストリームPCR解析"）。
1本のチューブ内で、全血0.1～20 ml、バフィコート0.1～2 ml、培養細胞1～2 x 106個からDNAを精製し、遠心操作による処理も可能です。12サンプルを1時間で調製できます。サンプルサイズによって、再水和容量は0.2～1 mlになります。
FlexiGene製法を用いて様々なサンプルタイプから精製されたDNAの収量 サンプル 容量 DNA収量（µg） 血液* 0.3 ml 11-14 血液* 2.0 ml 75-90 血液* 10.0 ml 380-460 バフィコート 0.5 ml 110-130 HeLa細胞 106個 25-35 *白血球数が正常な全血（7 x 106個/ml血液）。
| サンプル | 容量 | DNA収量（µg） |
|---|---|---|
| 血液* | 0.3 ml | 11-14 |
| 血液* | 2.0 ml | 75-90 |
| 血液* | 10.0 ml | 380-460 |
| バフィコート | 0.5 ml | 110-130 |
| HeLa細胞 | 106個 | 25-35 |
図参照
原理
FlexiGene DNAシステムは様々な量の全血、バフィコート、培養細胞からのゲノムDNA単離を可能にします。1本のチューブ中で簡単に精製操作を行なうことができるので、経費を節約し、取り扱いが容易になります。精製DNAは感度の高いアプリケーションに最適です。
操作手順
最初のステップでは溶解バッファーをサンプルに添加します（フローチャート" FlexiGene DNA操作手順"）。細胞核とミトコンドリアを遠心操作によりペレット化し、QIAGEN Proteaseを含む変性バッファーに再懸濁します。タンパク質分解に続き、イソプロパノールの添加によりDNAを沈殿させ、遠心操作により再回収し、70％エタノールで洗浄、乾燥します。水性バッファーにDNAを再懸濁し、ダウンストリームアッセイに直接使用するか-20℃で保存します。全血、バフィコート、培養細胞から高い収量でDNAが得られます（表"FlexiGene製法を用いて様々なサンプルタイプから精製されたDNAの収量"）。
図参照
アプリケーション
FlexiGene DNA Kitを用いて精製したDNAは以下のようなダウンストリームアプリケーションに最適です。
- PCR
- サザンブロット法
- アーカイビング
裏付けデータと数値
FlexiGene DNA procedure.
The first step is addition of lysis buffer to the samples. Cell nuclei and mitochondria are pelleted by centrifugation and resuspended in denaturation buffer containing QIAGEN Protease. Following protein digestion, DNA is precipitated by addition of isopropanol, recovered by centrifugation, washed in 70% ethanol, and dried. DNA is resuspended in hydration buffer and is ready for direct use in downstream assays or storage at –20ºC.
Specifications
| Features | Specifications |
|---|---|
| Applications | PCR techniques, restriction digest, Southern blotting, sequencing |
| Sample amount | 100 µl - 20 ml |
| Format | Scalable |
| Time per run or per prep | 25 - 45 minutes (+ DNA rehydration) |
| Main sample type | Whole blood, buffy coat, cultured cells |
| Technology | Single tube precipitation method |
| Processing | Manual |
| Yield | 35 µg / ml whole blood |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | Genomic DNA |
| Elution volume | 200 µl - 1000 µl |
リソース
キットハンドブック (1)
追加リソース (2)
Supplementary Protocols (1)
MSDS (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publications
The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205
FAQ
Do you have a protocol for purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit?
Do you have stability data for genomic DNA isolated with the Flexigene DNA Kit?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?
What is the composition of Buffer FG3?