KRAS Pyro Kit
基于序列定量分析KRAS基因中的突变
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特点
- 实时获得多个结果
- 准确定量KRAS基因中的突变
- 简便检测复杂突变
- 序列信息提供检测的内置参照
- 灵活的后续分析
产品详情
KRAS Pyro Kit是用于鉴定KRAS基因中突变的分子检测试剂盒。该试剂盒包含扩增KRAS基因所需的引物和试剂、外加缓冲液、引物和试剂，在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术实时定量检测突变。
原理
KRAS Pyro Kit用于实时定量检测人KRAS基因编码子12、13和61的突变，在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术检测。KRAS基因编码一种在EGFR信号通路中有重要作用的蛋白。KRAS基因的突变会影响该蛋白对下游通路的激活。所有癌症中将近30%发生KRAS基因突变，其中直肠癌（35%）和肺癌（18%）。
可检测以下种类的突变：
- 编码子12/13：G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V和G13D
- 编码子61：Q61E、Q61H、Q61L和Q61R
程序
该试剂盒包含2部分实验：一个用于检测编码子12和13的突变；另一个用于检测编码子61的突变（参见" Illustration of the KRAS assay"和" Pyrogram trace of a normal genotype in codons 12 and 13"）。运用PCR技术对这两个片段分别进行扩增，测定特定区域的核酸序列。使用该法进行定量和定性分析时，特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。
使用针对编码子12/13和编码子61的引物对两个片段PCR扩增后，将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24 System上设置程序和运行程序对样品进行分析。推荐使用KRAS Plug-in Report进行分析。该报告确保使用正确的LODs和分析的不同序列可自动检测所有突变。也可在PyroMark Q24 System上使用其他分析工具进行分析（参见" Pyrogram trace of a GGT to GAT mutation in base 2 of codon 12"）。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测稀有突变（参见" Pyrogram trace of a GGT to TGT mutation in base 1 of codon 12"和" Pyrogram trace of the reanalysis of the sample in the previous figure"）。
查看图表
应用
KRAS Pyro Kit确保准确定量突变分析，适用于各种研究领域，包括癌症和表观遗传学研究。该试剂盒用于检测人KRAS基因编码子12、13和61常见的突变。
可检测以下种类的突变：
- 编码子12/13：G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V和G13D
- 编码子61：Q61E、Q61H、Q61L和Q61R
辅助数据和图表
Pyrogram trace of a normal genotype in codons 12 and 13.
Pyrogram trace of a normal genotype in codons 12 and 13.
资源
试剂盒操作手册 (3)
分析软件 (1)
安全数据表 (1)
软件使用指南 (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
FAQ
Can I use more than 10ng DNA for the PCR reaction for the Pyro kits?
What ought I do if mutation assays designed by QIAGEN fail?
How do I analyze codon 61 mutations with the RAS extension kit (cat. no. 971590)?
Which purification kits are recommended for the Pyro kits?
What plug-ins are available for the Pyrosequencing kits?
Can PyroMark Gold reagents be vortexed?