TopTaq DNA Polymerase
高度可靠的PCR实验,无可比拟的方便性
高度可靠的PCR实验,无可比拟的方便性
TopTaq DNA Polymerase具有一系列方便易用的特点,提供前所未有的应用便捷性和高DNA产量。酶保存液中含有独特的TopTaq稳定剂,可以在4°C下稳定保存TopTaq DNA Polymerase,并且在室温下进行反应体系构建,无需费时的解冻过程。CoralLoad Concentrate包含两种胶示踪染料,便于移液可视化,并可将PCR产物直接上样电泳。即使在相同的Mg2+浓度和退火温度下扩增不同长度的片段,依然可获得高产量PCR产物。
TopTaq DNA Polymerase是重组的94 kDa耐热DNA聚合酶。由QIAGEN研发的TopTaq DNA Polymerase,提供前所未有的应用便捷性和高度可靠的终点式PCR。直到研发了TopTaq PCR体系,所有PCR酶都需要在–20°C储存;然而,因为酶保存液中有独特的专有TopTaq稳定剂,TopTaq DNA Polymerase是第一款能在4°C下储存的试剂盒。
TopTaq DNA Polymerase配合新型的TopTaq PCR Buffer使用,有利于通过提供高比率的特异性-非特异性引物结合来扩增特异性PCR产物。由于KCl和(NH4)2SO4独特的均衡结合,比传统的PCR缓冲液,该PCR缓冲液提供广泛的退火温度和Mg2+浓度条件以及严格的引物-退火条件(参见"Increased specificity of primer annealing")。通过调节退火温度或Mg2+浓度可显著减少优化PCR过程的需要,有时不需要优化。因此,TopTaq DNA Polymerase提供与Taq DNA Polymerase相同的可靠性和特异性,并且能额外地在一些PCR反应体系中提供优化的性能,得到更多的PCR产物(参见"High yields of PCR product without optimization")。
TopTaq稳定剂与TopTaq DNA Polymerase在4°C以及室温下结合,防止聚合酶在长期储存中降解,同时避免模板DNA和引物在低温下与聚合酶结合。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂从聚合酶中分离,而不影响聚合酶的活性(参见"Stabilization at 4°C")。
为了更方便使用,成套提供TopTaq DNA Polymerase和CoralLoad Concentrate。CoralLoad Concentrate包含两种胶示踪染料。该独特的试剂提高了移液可视化,有助于去除DNA迁移距离并优化琼脂糖凝胶跑样时间。使用CoralLoad Concentrate时,可将PCR产物直接上样到琼脂糖凝胶上而不需要事先另外加缓冲液(参见"Convenient CoralLoad Concentrate")。
独特的PCR缓冲液,具有均衡的钾和铵离子,配合TopTaq DNA Polymerase使用能促进特异性引物-模板退火,同时减少非特异性退火。即使使用少量模板也能获得最大量的特异性产物。独特的缓冲液制备和单独的预优化实验方案消除了个体-引物体系实验参数优化的需求,节省了时间和成本。甚至使用相同的Mg2+浓度和退火温度扩增大量不同大小的片段,也可获得高产量的特异性扩增产物(参见"High PCR product yields without optimization")。
新型的PCR辅助剂有助于通过修改DNA熔化行为来扩增困难模板。使用该独特的试剂通常能进行或促进欠佳的PCR反应。不同于DMSO和其他的PCR辅助剂, Q-Solution可在各种引物-模板体系的确定工作浓度下使用,且无毒。
由于酶保存液中含有独特的专有TopTaq稳定剂,TopTaq DNA Polymerase是第一款可在4°C下常规储存的试剂盒。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂可从聚合酶中分离而不影响聚合酶活性。这提高了便利性,能够立即进行反应设置,无需使用冰,节省了解冻过程的时间(参见"TopTaq procedure")。所有组件都可以在室温下相结合,无需冰上工作。独特的缓冲液制备和单独的预优化实验方案消除了单个引物-模板体系实验参数的优化需求。
TopTaq DNA Polymerase高度适用于所有终点法PCR应用。
Features | Specifications |
---|---|
Applications | PCR, RT-PCR, DNA fingerprinting |
dNTP's included | No |
Enzyme activity | 5' -> 3' exonuclease activity |
Real-time or endpoint | Endpoint |
Reaction type | PCR amplification |
Mastermix | No |
Sample/target type | Genomic DNA and cDNA |
Single or multiplex | Single |
Storage conditions | Fridge storage and room temperature setup |
With/without hotstart | Without Hotstart |