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特点
- 操作简便，无样本混淆风险
- 可从 0.1-20 ml 全血中进行可扩展纯化
- 直接从全血、血沉棕黄层和培养细胞中纯化
- 快速操作流程
- 无有机萃取
产品详情
FlexiGene 系统利用简单的离心操作，从全血、血沉棕黄层和培养细胞中分离高纯度 DNA。FlexiGene DNA Kit 包含缓冲液和 QIAGEN Protease，可直接在单管中进行简单的纯化。有关使用 FlexiGene 试剂的自动化解决方案，请联系 Autogen, Inc.。
绩效
使用 FlexiGene 系统纯化的 DNA 大小可达 150 kb（见图“ 高品质基因组 DNA”）。它在扩增和南方印迹法实验中表现出色，也适用于归档（见图“ 高效的下游 PCR 分析”）。
从经离心处理的单管内的 0.1-20 ml（血液）、0.1-2 ml（血沉棕黄层）或 1-2 x 106 个细胞（培养细胞）中纯化 DNA。1 小时内可处理十二个样本。根据样本量的不同，补液量为 0.2-1 ml。
| 样本 | 体积 | DNA 产量 (µg) |
|---|---|---|
| 血液* | 0.3 ml | 11-14 |
| 血液* | 2.0 ml | 75-90 |
| 血液* | 10.0 ml | 380-460 |
| 血沉棕黄层 | 0.5 ml | 110-130 |
| HeLa 细胞 | 106 个细胞 | 25-35 |
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原理
FlexiGene DNA 系统可从不同量的全血、血沉棕黄层和培养细胞中分离基因组 DNA。简单的纯化操作流程在单管内完成，从而降低成本并简化操作。纯化的 DNA 在敏感的下游应用中表现出色。
程序
第一步是在样本中加入裂解缓冲液（见流程图“ FlexiGene DNA 操作流程”）。通过离心将细胞核和线粒体沉淀，然后在含有 QIAGEN Protease 的变性缓冲液中重新悬浮。蛋白消化后，添加异丙醇沉淀 DNA，离心回收，用 70% 乙醇洗涤，然后干燥。DNA 在水化缓冲液中重新悬浮后，即可直接用于下游检测或在 –20ºC 下储存。从全血、血沉棕黄层和培养细胞中获得高产量的 DNA（见表“使用 FlexiGene 操作流程从不同类型样本中纯化出的 DNA 产量”）。
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应用
使用 FlexiGene DNA 试剂盒纯化的 DNA 在下游应用中表现出色，包括
- PCR
- 南方印迹法
- 归档
辅助数据和图表
FlexiGene DNA 操作流程。
第一步是将裂解缓冲液添加到样本中。通过离心将细胞核和线粒体沉淀，然后在含有 QIAGEN Protease 的变性缓冲液中重新悬浮。蛋白消化后，添加异丙醇沉淀 DNA，离心回收，用 70% 乙醇洗涤，然后干燥。DNA 在水化缓冲液中重新悬浮后，即可直接用于下游检测或在 –20ºC 下储存。
Specifications
| Features | Specifications |
|---|---|
| Applications | PCR 技术、限制性消化、南方印迹法、测序 |
| Sample amount | 100 µl - 20 ml |
| Format | 可扩展 |
| Time per run or per prep | 25 - 45 分钟（+ DNA 复水） |
| Main sample type | 全血、血沉棕黄层、培养细胞 |
| Technology | 单管沉淀法 |
| Processing | 手动 |
| Yield | 35 µg/ml 全血 |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | 基因组 DNA |
| Elution volume | 200 µl - 1000 µl |
资源
试剂盒操作手册 (1)
其他资源 (1)
补充实验方案 (1)
安全数据表 (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publications
The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205
FAQ
Do you have a protocol for purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit?
Do you have stability data for genomic DNA isolated with the Flexigene DNA Kit?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?
What is the composition of Buffer FG3?