Stellen Sie nahtlos auf QuantiNova qPCR um

Die QuantiNova Kit-Familie repräsentiert unsere fortschrittlichste Generation von Kits für Real-time PCR und RT-PCR mit einer Leistung, die der der QuantiFast und Rotor-Gene Kits entspricht oder diese übertrifft. Die QuantiNova Kits werden die QuantiFast und Rotor-Gene PCR-Produktlinien ersetzen, für welche die Produktion zum 30. Juni 2021 eingestellt wurde. Beide bleiben erhältlich, bis der Bestand erschöpft ist. Die QuantiNova Kits bieten zahlreiche Vorteile wie etwa bessere Handhabung, Geschwindigkeit und prozessbegeleitende Sicherheitsmerkmale für einen Workflow mit überragender Zuverlässigkeit und Effizienz.

• Integrierte optische Pipettierkontrolle verhindert Handhabungsfehler
• Interne Kontroll-RNA und -Assays verhindern eine Fehlquantifizierung aufgrund von Inhibitoren
• Der stringente, mit Schutzmolekül ausgestattete Hot Start der Polymerase sorgt für eine ausgezeichnete Spezifität
• Einzigartiger 2-phasiger Hot Start für 1-Schritt-RT-PCR erleichtert die Reaktionseinrichtung bei Raumtemperatur
• Mit ultraschnellen Protokollen für cDNA und PCR in nur 1 Stunde von der RNA zum Ergebnis
• Reverse Transkription mit integrierter gDNA-Entfernung verhindert eine Fehlquantifizierung durch gDNA

Wie fällt die Leistung des Nachfolge-Kits verglichen mit dem Kit aus, das ich derzeit in Benutzung habe?

QIAGEN hat die Nachfolge-Kits entwickelt, um sowohl Leistung als auch Handhabung, Geschwindigkeit und weitere Merkmale gegenüber der Vorgängerversion zu verbessern. Bitte besuchen Sie die Katalogseite des Nachfolge-Kits, um mehr über diese Merkmale zu erfahren oder das Protokoll herunterzuladen.

Der Absatz zum Thema Leistung und insbesondere die „Bild-Lightbox“ enthalten Leistungs- und Vergleichsdaten verglichen zum Vorgänger-Kit und üblich verwendeten PCR-Kits anderer Hersteller.

Sie können auch die entsprechenden Produktprofile herunterladen oder die oben verlinkten Katalogseiten besuchen, um Details über die Leistungsfähigkeit einzusehen.

Wie kann ich ein Probe-Kit des Nachfolge-Kits anfordern?

Bitte besuchen Sie die Katalogseite des Nachfolge-Kits, um mehr darüber zu erfahren, und klicken Sie auf den Link „Probe-Kit anfordern“. Dadurch wird automatisch ein Anforderungsformular erstellt und Ihre Anfrage abgesendet. Bitte beachten: Die Bestimmungen und rechtlichen Voraussetzungen für die Bereitstellung von Probe-Kits können in Ihrem Land abweichen.

Wie stelle ich eine optimale Leistung des Nachfolge-Kits sicher?

Als allgemeine Regel halten Sie sich bitte an das Protokoll des Nachfolge-Kits. Es wurde für die neu entwickelte Kit-Zusammensetzung optimiert und bietet zahlreiche Vorteile wie eine höhere Geschwindigkeit, Ausbeute und Spezifität. Sie werden nur von diesen Verbesserungen profitieren, wenn Sie sich an das empfohlene Protokoll halten. Sehen Sie davon ab, die Protokolle anderer oder älterer Kits zu kopieren.

Bei technischen Fragen unterstützt unser technisches Service-Team Sie gern.

Ich verwende das ältere QIAGEN Kit in einem validierten Verfahren oder eine speziell angepasste Version und kann meine Laborroutine nicht einfach ändern. Wie kann ich einen nahtlosen Übergang sicherstellen?

Bitte wenden Sie sich an Ihren Kundenbetreuer bei QIAGEN oder kontaktieren Sie uns direkt, wenn die Einstellung der oben aufgeführten Kits für Sie mit signifikanten Problemen verbunden ist. Es ist auch unser Ziel, Ihre fortlaufend funktionsfähige Laborroutine aufrechtzuerhalten und wir sind überzeugt, dass wir die richtige Lösung finden werden. Bitte teilen Sie uns Ihre Anforderungen oder Probleme unter www.qiagen.com/techsupport-web mit oder nutzen Sie die Chatfunktion.

Was sind meine Bestellbedingungen für das Nachfolge-Kit?

Die Geschäftsbedingungen gelten wie auf den Katalogseiten angegeben. Wenn für Ihr Institut oder Kundenkonto spezifische Vereinbarungen oder Anforderungen gelten, wenden Sie sich bitte an Ihren Kundenbetreuer bei QIAGEN. Jede exklusive Vereinbarung erfordert eine Implementierung über Anfrage und Einrichtung, bevor sie in unserem Bestellsystem aktiv wird.

Unterscheidet sich die Taq-Polymerase der QuantiNova Kits von der der QuantiFast/Rotor-Gene Kits?

Nein, beide Arten von Kits enthalten die gleiche Taq-Polymerase. Die Art, wie sie inaktiv gehalten wird, unterscheidet sich jedoch. Die QuantiNova Kits verwenden einen Antikörper-vermittelten Hot-Start-Mechanismus, während die QuantiFast/Rotor-Gene Kits mit einem chemischen Hot-Start-Mechanismus arbeiten.

Wie unterscheidet sich das Hot-Start-Verfahren der QuantiNova Kits von dem der QuantiFast oder Rotor-Gene Kits?

Bei den QuantiFast und Rotor-Gene Kits erfolgt der Hot Start der Taq-Polymerase über einen chemischen Mechanismus. Zwar stellt die chemische Inaktivierung eine sehr stringente Hot-Start-Kontrolle dar, doch die Reaktivierung erfolgt relativ langsam. Bei den QuantiNova Kits kommt eine neuartige und stringente Antikörper-vermittelte Hot-Start-Kontrolle zum Einsatz, die die Reaktivierung der Taq-Polymerase innerhalb von 2–3 Minuten erlaubt. Zudem ist das Enzym durch ein QuantiNova Schutzmolekül geschützt, welches für eine außergewöhnliche Stringenz des Hot Start und damit für höchste Spezifität und Stabilität sorgt.

Unterscheidet sich die reverse Transkriptase im QuantiNova Kit von der in den QuantiFast/Rotor-Gene Kits?

Ja, die Enzyme unterscheiden sich. Die QuantiNova Kit-Familie enthält eine neu entwickelte, RNaseH-defiziente reverse Transkriptase aus dem murinen Moloney-Leukämievirus (Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase, M-MLV RT), die reverse Transkriptase bei QuantiFast/Rotor-Gene hingegen ist RNase H+.

Die QuantiNova RT Kits bieten noch weitere Vorteile. Die QuantiNova RT-PCR Kits für die 1-Schritt-RT-PCR arbeiten mit einem 2-phasigen Hot-Start-Verfahren, das die Reaktionseinrichtung bei Raumtemperatur ermöglicht und eine unerwünschte, verfrühte Enzymaktivität während der Reaktionseinrichtung verhindert. Die QuantiNova Probe RT-PCR Kits reduzieren zudem die genomische DNA, was die Präzision bei der mRNA-Quantifizierung steigert.

Beeinträchtigen die sichtbaren Pipettierfarbstoffe der QuantiNova Kits die PCR-Ergebnisse?

Nein, das tun sie nicht. Die Tracking-Farbstoffe erlauben die visuelle Überprüfung der manuellen oder automatischen Pipettierung. Sie wurden gründlich getestet und sind bereits seit mehreren Jahren in Gebrauch. Wir haben keinerlei Schwierigkeiten festgestellt.

Warum wird der ROX-Farbstoff in den QuantiNova Kits in einem separaten Röhrchen bereitgestellt?

Auf diese Weise wird die höchstmögliche Flexibilität bei Verwendung von ABI-Thermocyclern erreicht, welche ROX als Referenzfarbstoff benötigen. Vor der Verwendung wird eine jeweils spezifische Menge an ROX zugegeben, um den Anforderungen von „Low ROX“- und „High ROX“-Thermocyclern gerecht zu werden, wie in unserem Handbuch beschrieben. Bei anderen Thermocyclern, die in der Regel nicht auf ROX als Referenzfarbstoff angewiesen sind, könnte der entsprechende Kanal für den Target-Nachweis verwendet werden.

Warum enthalten die QuantiNova RT-PCR und Reverse Transcription Kits RNA als interne Kontrolle (Internal Control, IC)?

IC-RNA ist ein wichtiges Sicherheitswerkzeug zur spezifischen Überwachung auf das Vorliegen von Inhibitoren. Ihre Verwendung ist optional und die entsprechenden SYBR Green- oder sondenmarkierten IC-Assays sind als Zubehör in unserem (Web-) Katalog erhältlich. Von der RNA-Extraktion oder cDNA-Synthese verschleppte Inhibitoren führen nicht unbedingt zu einem kompletten Versagen der qPCR-Reaktion, aber sie können die PCR-Effizienz beeinträchtigen und die C_T- oder C_q-Werte verschieben. Dieser Effekt ist weder sichtbar noch quantifizierbar und hat damit das Potenzial, zu einer signifikanten, nicht reproduzierbaren Fehlquantifizierung der Real-time PCR-Ergebnisse zu führen. Das Mitführen einer internen Kontroll-RNA kann diese Effekte vermeiden und ist eine Standardanforderung bei Real-time PCR-Verfahren in der IVD. Wir empfehlen ihre Verwendung auch für die Real-time PCR im Rahmen von Genexpressionsanalysen, da sie praktisch und benutzerfreundlich in unseren QuantiNova Kits enthalten ist.

Erhalte ich unterschiedliche Ergebnisse oder Messwerte, wenn ich von den QuantiFast/Rotor-Gene Kits zu den QuantiNova Kits wechsele?

Alle Ergebnisse sollten zwischen beiden Kit-Familien sehr einheitlich und vergleichbar sein. Bei einzelnen Assays kann jedoch ein leicht unterschiedliches Verhalten auftreten, und die RFU-Werte der QuantiNova SYBR Green PCR Kits sind höher als die der QuantiFast/Rotor-Gene Kits, um ein konsistenteres und robusteres Signal zu generieren (dies beeinflusst nicht die C_T- oder C_q-Werte).

Um von Anfang an optimale Ergebnisse zu gewährleisten, empfehlen wir dringend die Verwendung des Standardprotokolls für die Reaktionseinrichtung und der Zyklusprofile, die im QuantiNova Quick Start Protocol and Handbook (QuantiNova Kurzprotokoll und Handbuch) angegeben sind. So können Sie den meisten Nutzen aus den verbesserten QuantiNova Funktionen ziehen.

Ist das Rotor-Gene Q Gerät von der Einstellung dieses Reagenzien-Kits betroffen?

Nein, das Rotor-Gene Q Gerät ist nicht betroffen. Wir werden es auch weiterhin als zentrale Komponente unseres Assay-Technologie-Portfolios anbieten.

Ich arbeite in validierten Verfahren wie dem Nachweis von SARS-CoV-2 oder anderen Pathogenen mit den QuantiFast Pathogen (RT-) PCR + IC Kits (oder QuantiFast Multiplex RT-PCR Kits). Sind diese Produkte von der Einstellung betroffen?

Nein, die QuantiFast Pathogen PCR + IC Kits (Kat.-Nr. 211352, 211354), das QuantiFast Pathogen RT-PCR + IC Kit (Kat.-Nr. 211454) und die Internal Control DNA/RNA (Kat.-Nr. 211392, 211492) sind nicht von dieser Einstellung betroffen und bleiben Teil unseres Portfolios. Auch das QuantiFast Multiplex RT-PCR +R Kit (2000) (Kat.-Nr. 204956) bleibt weiterhin erhältlich. Allerdings werden die kleineren Packungsgrößen des QuantiFast Multiplex RT-PCR Kit nur noch bis 30. Juni 2021 angeboten.